Возбудители лептоспироза. Микробиологическая диагностика

• Возбудители: Leptospira interrogans (Грам- спирохета).
• Морфология: тонкие спирали с загнутыми концами, подвижны.
• Культуральные: строгие аэробы, растут на сывороточных средах (Ферворта-Вольфа) при 28-30°C.
• Антигены: серогруппы (О) и серовары (Н).
• Факторы патогенности: эндотоксин, гемолизины.
• Эпидемиология: зооноз (грызуны, скот), водный путь.
• Диагностика: темнопольная микроскопия, посев, РМА (серология), ПЦР, биопроба.
• Лечение: антибиотики (пенициллин), иммуноглобулин.

Таксономия: возбудители лептоспироза относятся к семейству Leptospiraceae, роду Leptospira. Патогенные виды включают Leptospira interrogans (основной), а также L. borgpetersenii, L. kirschneri и др. Серовары (более 250) объединены в серогруппы.

Морфология и тинкториальные свойства: лептоспиры — грамотрицательные (Грам-) спирохеты, имеют форму тонких спиралей с загнутыми концами (в виде вопросительного знака). Длина 6-20 мкм, толщина 0,1-0,2 мкм. Подвижны за счет осевой нити (эндожгутиков). Спор и капсул не образуют. Плохо окрашиваются анилиновыми красителями; по Романовскому-Гимзе — розово-фиолетовые. Импрегнация серебром (метод Левадити) — коричневые. В темном поле — серебристо-белые.

Культуральные свойства: строгие аэробы. Растут на жидких и полужидких средах, содержащих сыворотку крови кролика (среда Ферворта-Вольфа, среда Терских). Оптимум pH 7,2-7,4, температура 28-30°C. Рост медленный (5-7 дней). На жидких средах — легкое помутнение, на полужидких — зона роста в виде диска на 0,5-1 см ниже поверхности.

Биохимические свойства: слабая биохимическая активность. Не ферментируют углеводы. Образуют каталазу, оксидазу. Разжижают желатин. Утилизируют длинноцепочечные жирные кислоты.

Антигенная структура: по соматическому (О) антигену делятся на серогруппы, по поверхностному (Н) — на серовары. Патогенные виды содержат родоспецифический антиген (F4) и типоспецифические (F1, F2, F3).

Факторы патогенности: эндотоксин (ЛПС), гемолизины, фибринолизин, липаза, протеазы, адгезины. Подвижность способствует инвазии.

Эпидемиология: антропозооноз. Источники — грызуны (крысы, мыши), сельскохозяйственные животные (свиньи, крупный рогатый скот), собаки. Механизм передачи — фекально-оральный, контактный. Пути — водный (купание, питье), пищевой, контактный (через поврежденную кожу и слизистые). Сезонность — летне-осенняя.

Патогенез и клинические формы: входные ворота — микротравмы кожи, слизистые. Гематогенная диссеминация с поражением печени, почек, ЦНС, мышц. Инкубационный период 7-14 дней. Клинические формы: желтушная (болезнь Вейля-Васильева), безжелтушная, менингеальная. У детей — чаще безжелтушная форма с выраженной интоксикацией.

9. Микробиологическая диагностика:

• Материал: кровь (1-я неделя), моча (со 2-й недели), ликвор (при менингеальной форме), биоптаты органов.
• Бактериоскопический метод: темнопольная микроскопия (нативный материал), микроскопия мазков по Романовскому-Гимзе, импрегнация серебром. Чувствительность низкая.
• Бактериологический метод: посев на среды Ферворта-Вольфа, Терских. Инкубация 28-30°C до 4 недель. Идентификация по подвижности, морфологии, серотипирование в РА с типоспецифическими сыворотками.
• Серологический метод: РА (реакция агглютинации) с живыми культурами (микроагглютинация, РМА) — основной метод. Диагностический титр 1:100 и выше. ИФА (IgM, IgG). РСК, РНГА.
• Биопроба: заражение морских свинок (внутрибрюшинно) — материал от больного. Через 5-7 дней — выделение культуры из крови/органов.
• ПЦР: высокочувствительный метод, позволяет выявить ДНК лептоспир в крови, моче, ликворе.

Специфическая профилактика и лечение: профилактика — убитая поливалентная вакцина (лептоспирозная вакцина), вакцинация животных. Лечение — антибиотики (пенициллин, доксициклин, цефтриаксон), специфический иммуноглобулин (противолептоспирозный).