Иммунолюминесцентный метод в диагностике инфекций

• Иммунолюминесцентный метод (ИЛМ) основан на реакции антиген-антитело с использованием меченых флуорохромами антител.
• Прямой вариант: меченое антитело к антигену; непрямой: два антитела (немеченое + меченое против первого).
• Применяется для быстрой диагностики респираторных вирусных инфекций (РС-вирус, аденовирусы), хламидиоза, бешенства.
• У детей раннего возраста предпочтительно выявление антигена (избежать ложноположительных результатов от материнских антител).
• Используется для иммунофенотипирования лимфоцитов (CD-маркеры) при иммунодефицитах.

Иммунолюминесцентный метод (ИЛМ) — метод выявления антигенов или антител с помощью антител, меченных флуоресцентными красителями (флуоресцеин изотиоцианат, родамин и др.). Основан на реакции антиген-антитело, визуализируемой в люминесцентном микроскопе. Различают прямой и непрямой варианты. Прямой метод: меченое антитело непосредственно связывается с искомым антигеном. Непрямой метод: немеченое антитело (первое) связывается с антигеном, затем добавляется меченое антитело против первого (второе). Непрямой метод более чувствителен, так как одна молекула первого антитела связывает несколько молекул второго. ИЛМ применяют для быстрой диагностики инфекций: обнаружение антигенов возбудителей в клиническом материале (мазки-отпечатки, смывы, биоптаты). Например, выявление респираторно-синцитиального вируса (RSV) в носоглоточных смывах у детей, хламидий (Chlamydia trachomatis) в урогенитальных мазках, вируса бешенства (Lyssavirus rabies) в отпечатках мозга. У детей раннего возраста ИЛМ особенно ценен для диагностики респираторных вирусных инфекций (РС-вирус, аденовирусы, вирусы парагриппа) в связи с быстрым получением результата (1-2 часа). Возрастные особенности: у новорождённых и детей первых месяцев жизни возможны ложноположительные результаты из-за материнских антител, поэтому предпочтительно выявление антигена, а не антител. Метод также используется для определения субпопуляций лимфоцитов (CD-маркеры) с помощью моноклональных антител, что важно для оценки иммунного статуса у детей с первичными иммунодефицитами. Чувствительность ИЛМ ниже, чем ИФА и ПЦР, но метод прост, не требует сложного оборудования и пригоден для скрининга.